本期課程安排

第一天上午9:00-12:00 ?下午13:30-17:00

第一講、CRISPR/Cas9基因組編輯技術的工作原理

1、基因組靶向修飾技術發展簡史（從基因打靶到基因組編輯）???

2、CRISPR/Cas9基因組編輯技術的工作原理

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第二講、CRISPR的設計

1、CRISPR設計的依據及原則 ???

2、常用CRISPR設計軟件簡介（CRISPR的在線設計簡介） ??

3、靶向編輯基因的基因型確認及CRISPR的再設計

第三講、CRISPR/Cas9基因組編輯工具的制備及向細胞內的遞送策略

1、DNA形式的基因組編輯工具的制備與遞送???

2、2、RNP形式的基因編輯工具的制備與遞送

第四講、sgRNA活性驗證

1、插入缺失（Indel）突變檢測的基本策略 ?

2、基于胚胎反應器的活性驗證方法

3、基于細胞系的活性驗證方法

第五講、利用CRISPR技術創制哺乳動物基因組編輯細胞系

1、基因敲入（如點突變和報告基因等）的供體設計原則及實例分析 ???

2、基因組編輯工具導入細胞系的方法（轉染與轉導） ??

3、基因組編輯細胞系的篩選及基因型的快速確認 ?????

4、基因編輯子的功能確認策略

第二天上午9:00-12:00 ????下午13:30-17:00

第六講、利用CRISPR技術創制基因敲除或敲入動物突變體（斑馬魚基因組編輯突變體的創制）

1、RNP基因組編輯工具（和供體）遞送至受精卵??

2、初建者（F0）體細胞攜帶靶向突變等位基因的鑒定????

3、基因組編輯突變體的篩選及建系（F1） ?

4、基因編輯子的功能確認策略??

第七講 ?利用CRISPR技術創建基因敲除或敲入植物、真菌 和 細菌突變體

1、基本過程 ????

2、基因組編輯工具的制作 ???

3、基因組編輯工具的遞送 ?????

4、基因組編輯突變體（F1）的篩選及建系 ????

5、基因編輯子的功能確認

第八講、CRSIPR/Cas9基因組編輯技術的脫靶問題

1、脫靶產生的原因 ???

2、脫靶檢測 ??

3、解決脫靶問題的方法 ?

4、脫靶問題對不同領域研究者的意義

第九講、CRISPRi或CRISPRa作為轉錄因子調控基因在細胞或胚胎中的表達

1、dCas9的特征簡介 ?

2、運用CRISPR技術調控基因在細胞或胚胎中表達的基本實驗過程???

3、CRISPR技術的轉錄抑制 ?4、CRISPR技術的轉錄活化???

5、堿基編輯技術（Base?Editor）???

6、CRISPR技術在（新冠病毒）核酸檢測中的應用

第十講、運用基因組編輯斑馬魚模型評價人突變基因在疾病發生中的作用與機制

1、科學問題的提出 ???

2、與疾病共分離的遺傳突變的常見類型 ??

3、利用斑馬魚模型解析疾病發生機制研究的一般策略???

4、評價人突變基因的斑馬魚模型的建立（人源化斑馬魚模型、CRISPant敲降） ?

5、斑馬魚模型表型模擬人類疾病臨床特征（顯微形態學和轉錄組學）及突變基因致病機制解析 ????

第十一講 “基因編輯嬰兒”事件及CRISPR技術的倫理學規范

1、基因組編輯技術的發展與應用????

2、“基因編輯嬰兒”事件 ??

3、基因組編輯技術的倫理學規范